Distribución y caracterización serológica de aislamientos del virus de la tristeza de los cítricos en Colombia

En Colombia se registró la aparición de la tristeza de los cítricos en el año 1940, causando síntomas de acanaladuras en el tallo y declinamiento rápido de árboles; otros trabajos ilustraron la presencia del vector Toxoptera citricida (Kirkaldi) y de razas severas del virus, en diferentes regiones del pais. Frente a la complejidad de la problemática, se planteó la presente investigación con el propósito de generar una colección de razas del virus de la tristeza de los cítricos y a partir de sus correspondientes perfiles serológicos y biológicos, identificar y conservar aislamientos tipo tenue de uso potencial para protección cruzada contra razas severas de CTV. Para tal fin se realizó la colección de 139 aislamientos en áreas productoras de cítricos de los departamentos del Meta, Valle del Cauca, Quindío, Risaralda, Cundinamarca, Tolima, Atlántico y Magdalena. Los aislamientos colectados fueron analizados con pruebas serológicas utilizando un antisuero policlonal general (IgG-CTV) y el antisuero monoclonal MCA13 que genera una reacción positiva frente a aislamientos severos. Adicionalmente, los aislamientos colectados fueron inoculados por medio de injerto en plantas de lima mexicana libres del virus para evaluar la expresión de síntomas típicos de la enfermedad. Los síntomas más comunes observados en condiciones de campo en las distintas zonas productoras fueron las acanaladuras en el tallo, la clorosis de nervaduras y el declinamiento en variedades de limas ácidas. Los análisis serológicos confirmaron la presencia del virus en el 95% de las muestras en la mayoría de zonas evaluadas; con excepción de Risaralda y Quindío, donde la frecuencia de muestras positivas fue de 76%. La reacción con el antisuero MCA13 fue negativa para algunos aislamientos procedentes de la zona cafetera, sugiriendo su posible naturaleza tenue. La ausencia de síntomas severos en plantas de lima mexicana inoculadas y el resultado negativo con el antisuero MCA 13 permitieron identificar tres aislamientos de la colección con características de aislamientos suaves, los cuales pueden considerarse como potenciales para desarrollar a partir de ellos cepas útiles en futuros programas de protección cruzada. = In Colombia the occurrence of CTV infected trees showing decline and stem pitting was reported since 1940; and later reports indicated the presence of Toxoptera citricida (Kirkaldi) an efficient vector of severe strains of the virus. This paper describes results from a 3-year study whose objective was to build a collection of CTV isolates from different regions of Colombia, characterize it by serological and biological procedures, and to identify mild virus isolates for testing in cross protection studies. 139 field isolates were collected from citrus orchards in eight department (Valle del Cauca, Quindlo, Risaralda, Cundinamarca, Tolima, Atlántico, Meta and Magdalena). The samples were analyzed with the polyclonal antiserum IgG CTV and the specific monoclonal antibody MCA13, to determine the presence of virus particles and the virulence profile of the strains. In order to determine the biological severity of these field isolates, they were grafted onto virus-free Mexican lime seedlings which were grown inside an aphid- proof screenhouse, and evaluated for CTV symptoms (including vein- clearing, vein corking, epinasty and stem pitting). Over 95% of the samples from all the regions were infected by the virus. When analyzed with the MCA13 monoclonal antibody, all samples from six out of the eight sates reacted positive, approximately 24% of the isolates from Quindio and Risaralda were negative for this severe strain- specific antibody. Only three isolates out of 130 failed to induce severe CTV symptoms on Mexican lime and gave negative reaction with the MCA13 monoclonal antibody. These isolates may be potential donors of mild strains which could be useful in cross protection studies.